永生化人II型肺泡上皮细胞系是一种先进的细胞模型，通过基因转染技术将永生化基因（如SV40LargeT抗原或hTERT）导入原代人II型肺泡上皮细胞而构建。该细胞系不仅保留了原代细胞的形态特征和生物学功能，同时具备了稳定的增殖能力，是研究肺生理学、肺泡修复机制、肺部疾病以及药物毒性评估的重要工具，具有很高的科研应用价值。

细胞的形态呈立方形或圆形，展现出典型的II型肺泡上皮细胞超微结构特征，包括：

• 特异性标志物表达：如表面活性蛋白C（SP-C）和表面活性蛋白B（SP-B）均呈阳性，并且角蛋白（Cytokeratin）也显示阳性。
• 板层体结构：通过电镜观察到胞质内有板层体结构，负责合成和储存肺表面活性物质。
• 离子转运功能：细胞表达钠离子通道（ENaC）和囊性纤维化跨膜调节因子（CFTR），具有明显的离子转运能力。
• 再生修复潜能：在特定条件下，该细胞可增殖并分化，参与肺泡上皮的修复过程。

通过引入永生化基因，该细胞系克服了原代细胞复制衰老的限制，并保持了II型肺泡上皮细胞的主要功能特性，适合于长期的实验研究。

培养条件方面，使用DMEM/F12基础培养基，加入10% FBS、1%青霉素-链霉素和1% L-谷氨酰胺。根据实验需求可添加KGF、地塞米松或8-Br-cAMP以维持细胞表型。推荐使用涂层有胶原蛋白（I或IV型）的培养器皿，并在37°C、5% CO₂的环境中培养。

细胞传代时，需要严格控制消化时间，以避免功能丧失。建议使用P5-P20代次细胞进行关键实验，进行功能研究时最好采用气-液界面（ALI）培养条件，以更接近体内环境。此外，定期监测永生化基因表达和支原体污染，确保细胞特性稳定。

永生化人II型肺泡上皮细胞在多个研究领域中具有重要的应用价值，包括：

• 肺表面活性物质研究：用于表面活性物质合成、分泌和调控机制的研究。
• 肺部疾病建模：能够帮助揭示急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征及肺纤维化等疾病的机制。
• 药物毒性评估：作为体外模型，评估吸入药物、纳米颗粒及环境污染物的肺毒性。
• 病原体-宿主相互作用研究：用于研究呼吸道病毒（如流感病毒、SARS-CoV-2）与肺泡上皮的相互作用。
• 肺泡修复机制研究：阐明II型肺泡上皮细胞在肺泡修复与再生中的作用机制。

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