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尊龙凯时蛋白质纯化步骤解析

发布时间:2025-08-31   信息来源:尊龙凯时官方编辑

操作步骤:

尊龙凯时蛋白质纯化步骤解析

溶液准备与处理

在生物医药研究中,所有在纯化系统中使用的溶液需在当日经过022μm的滤膜进行抽滤和脱气处理。此外,储存于冰箱的缓冲液如需在室温下使用,必须在恢复至室温后同样进行抽滤和脱气。

样品处理

在样品上柱进行纯化前,应首先对样品进行滤膜过滤,对于少量样品可以使用离心(13000rpm,10分钟)进行处理。保持仪器的清洁至关重要,因此,需依次使用水和缓冲液对泵进行冲洗。

系统设置

在设置流速和柱前警报压力时,应参考层析柱及填料说明书,选择较小的最大耐受压力,以此避免气泡进入柱中,从而影响分离效果。

流速与压力管理

若柱子限压为03MPa,或在限压状态下流速非常低时,pH阀中的Restirtor可切换为Offline状态,这会显示为By-pass状态。

上样过程

当通过仪器进行上样时,需要将W1阀口更换为带透明短软管的阀门,通过此阀门使用注射器进行样品的倒吸。确保进样阀处于“Inject”状态,完成上样后,将进样阀切换回“Load”状态,并用纯水仔细清洗上样环至少三次,最后恢复W1阀口至原接头阀门。

纯化后处理

纯化结束后,应使用纯水彻底清洗泵和平衡柱,之后再用20%的乙醇清洗泵及系统。若长时间不使用,则层析柱应保存在20%的乙醇中,而泵也应放置在20%的乙醇中,以保障系统的稳定性和可靠性。

通过以上步骤,您能够有效地进行生物医药产品的纯化,提升产品质量。而尊龙凯时始终致力于为研究人员提供高效、优质的生物医药解决方案,帮助您在科研中获得更好的成果。