尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒，具备以下显著特点：

产品特点

1. 即开即用：用户只需提供样品DNA模板，即可进行实验。

2. 高灵敏度：引物及其他组分经过优化，确保测试的灵敏度达到最佳水平。

3. 提供阳性对照：便于用户区分假阴性样品，提升检测的可靠性。

4. 高特异性：引物设计针对中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。

5. 适用范围广：本产品不仅适用于定性检测，还支持定量检测，线性范围可达至少5个数量级。

6. 使用经济：本试剂盒足够进行50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 仅限科研使用：本产品专为科研用途而设计。

使用方法

一、DNA提取

采用自选方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

由于阳性对照浓度较高，后续稀释操作应在独立区域内进行，以避免样品或试剂盒其他成分的污染。

1. 标记六个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。

2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。

3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，放冰上待用。

4. 依次稀释至5号管，重复操作，直到制作出6个稀释度的标准曲线样品。

若无需制作标准曲线，则可直接将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

根据待检样品的数量准备相应数量的qPCR管以及阳性对照与阴性对照，向各PCR管中添加相应成分（详见说明书）。

四、添加模板

向qPCR管中分别加入2μL模板，按阴性对照（DEPC-H2O），待测样品模板及阳性对照的顺序加入，随后离心30秒并立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放入PCR扩增仪器相应位置，按照扩增程序进行反应（详见说明书）。

六、结果分析

1. 进行标准曲线制作时，利用阳性对照浓度的log值作横轴，Ct值作纵轴绘制标准曲线，根据标准曲线推算样品DNA浓度。

2. 若未制作标准曲线，依据以下标准判定结果：阳性对照的Ct值应小于30，表现出明显的指数增长，并呈典型的S型曲线；阴性对照的Ct值应为38或无Ct值；待检测样本的Ct值小于35则判断为阳性，反之则为阴性。对于Ct值在35-38范围的样本，应进行复检确认。

运输及保存

本产品需低温运输，存储温度应为-20℃，保质期为一年。阳性对照应单独存放，避免污染其他试剂。

选择尊龙凯时，您将在生物医疗领域获得更值得信赖的检测体验。